1 试剂
1.1 标准枸橼酸钠浓溶液
精确称取枸橼酸钠(Na3C6H标准5O7·2H2O)0.5882g,加蒸馏水溶解，并准确稀释至100ml ，为20mmol/L 枸橼酸钠液。
1.2 标准枸橼酸钠溶液
精密量取标准枸橼酸钠浓溶液5ml，用5%三氯醋酸准确稀释至50ml，为2mmol/L枸橼酸钠标准液。
1.310%三氯醋酸：称取三氯醋酸10g，用蒸馏水稀释至100ml。
1.45%三氯醋酸：称取三氯醋酸5g，用蒸馏水稀释至100ml。
1.5 砒啶(A·R)。
1.6 醋酸酐(A·R)。
2 操作
2.1 样品
精确量取0.5ml样品，加 4.5ml 蒸馏水，加5ml10%三氯醋酸，混匀，置60℃水浴 5分钟，离心去沉淀。精确量取1ml上清液于25ml玻塞试管中，加1.3ml吡啶，混匀，加5.7ml 醋酸酐，立即混匀并置于31℃水浴，准确培育35分钟后，于 425nm波长下测 OD值，同时做空白试验：取1ml 5%三氯醋酸代替1ml去蛋白后样品上清液，其余操作同样品。
2.2 标准曲线
精确量取标准枸橼酸钠溶液0.0、0.25、0.50、0.75、1.0ml,分别加5%三氯醋酸1.0、0.75、0.5、0.25、0.0ml （其相应的枸橼酸钠离子含量为0、0.5、1.0、1.5、2.0mmol/l ），其余操作从加1.3ml吡啶开始同样品。可得一标准曲线。
3 计算
由标准曲线查得样品稀释液相当标准枸橼酸离子Ammol/L。
样品枸橼酸离子含量(mmol/L)=A×20